[Enzymatic resistance to beta lactam antibiotics within the genus Proteus and evaluation of Proteus mirabilis phenotypes and genotypes for resistance to third- and fourth-generation cephalosporins]. / Resistencia enzimática a betalactámicos en el género Proteus y evaluación de los fenotipos y genotipos de resistencia a cefalosporinas de tercera y cuarta generación en Proteus mirabilis.

INTRODUCTION: The aim of this study was to evaluate betalactam resistance within the genus Proteus and characterize the betalactamases responsible for this resistance. METHODS: We analyzed 99 strains (87, P. mirabilis; 10 P. vulgaris, and 2, P. penneri) isolated from patients at one University Hospital. Antibiotic susceptibility tests were performed according to NCCLS recommendations. Presence of extended spectrum betalactamases (ESBL) was inferred by both double disk diffusion tests and minimum inhibitory concentration (MIC) of third and fourth generation cephalosporins alone and in the presence of clavulanic acid. Isoelectric points (pI) of the enzymes were estimated by isoelectrofocusing and the presence of the encoding genes was confirmed by polymerase chain reaction (PCR). RESULTS: A broad spectrum betalactamase could be detected in those isolates (28%) resistant to penicillin and first generation cephalosporins while CTX-M-2 enzyme could be detected in P. mirabilis isolates resistant to third and fourth generation cephalosporins (18%). One of the P. vulgaris displayed reduced susceptibility to cefotaxime due to an enzyme of pI 7.4, while resistance to cefotaxime in one P. penneri was related to an enzyme of pI 6.8. Both enzymes were active on cefotaxime (1,000 mg/l) in the iodometric assay. CONCLUSION: The broad extended spectrum betalactamase within genus Proteus was TEM-1, while CTX-M-2 was the ESBL responsible for the third and fourth generation cephalosporins in P. mirabilis. In P. vulgaris and P. penneri this resistance was associated with the hyperproduction of the chromosomal encoded betalactamase.

Resistencia enzimática a betalactámicos en el género Proteus y evaluación de los fenotipos y genotipos de resistencia a cefalosporinas de tercera y cuarta generación en Proteus mirabilis / Enzymatic resistance to betalactam antibiotics within the genus Proteus and evaluation of third and fourth generation cephalosporins resistance phenotypes and genotypes within Proteus mirabilis

INTRODUCCIÓN. El objetivo de este trabajo fue evaluar la resistencia a betalactámicos en el género Proteusy caracterizar las betalactamasas responsables de dicha resistencia. MÉTODOS. Se analizaron 99 cepas (87 P. mirabilis;10 P. vulgaris, y 2, P. penneri) aisladas de pacientes atendidos en un Hospital Universitario. Los ensayos de susceptibilidad a antibióticos se realizaron de acuerdo con las recomendaciones del National Committee for Clinical Laboratory Standards. La presencia de betalactamasas de espectro extendido (BLEE)fue inferida por el método de difusión de doble disco y por la concentración inhibitoria mínima (CIM) de cefalosporinas de tercera y cuarta generación solas y en presencia de ácido clavulánico. Se estimó el punto isoeléctrico (pI) por isoelectro-enfoque y la presencia de los genes codificantes se confirmó por reacción en cadena de la polimerasa (PCR).RESULTADOS. Una betalactamasa de amplio espectro fue detectada en aquellos aislamientos resistentes apenicilinas y cefalosporinas de primera generación (28%),mientras que la enzima CTX-M-2 fue detectada en los aislamientos de P. mirabilis resistentes a cefalosporinas de tercera y cuarta generación (18%). Uno de los P. vulgaris presentó sensibilidad disminuida a cefotaxima debido a una enzima de pI 7,4, mientras que la resistencia a cefotaxima en un P. penneri fue relacionada con una enzima de pI 6,8. Ambas enzimas fueron activas sobre cefotaxima (1.000 mg/l) en el ensayo iodométrico. CONCLUSIÓN. La betalactamasa de amplio espectro en el género Proteus fue TEM-1 mientras queCTX-M-2 fue la BLEE responsable de la resistencia a cefalosporinas de tercera y cuarta generación en P. mirabilis. En P. vulgaris y P. penneri esta resistencia se asoció a la hiperproducción de la betalactamasa cromosómica (AU)

INTRODUCTION. The aim of this study was to evaluate betalactam resistance within the genus Proteus and characterize the betalactamases responsible for this resistance. METHODS. We analyzed 99 strains (87, P. mirabilis;10 P. vulgaris, and 2, P. penneri) isolated from patients at one University Hospital. Antibiotic susceptibility tests were performed according to NCCLS recommendations. Presence of extended spectrum betalactamases (ESBL)was inferred by both double disk diffusion tests andminimum inhibitory concentration (MIC) of third and fourth generation cephalosporins alone and in the presence of clavulanic acid. Isoelectric points (pI)of the enzymes were estimated by isoelectrofocusing and the presence of the encoding genes was confirmed by polymerase chain reaction (PCR).RESULTS. A broad spectrum betalactamase could be detected in those isolates (28%) resistant to penicillin and first generation cephalosporins while CTX-M-2 enzyme could be detected in P. mirabilis isolates resistant to third and fourth generation cephalosporins (18%). One of the P. vulgaris displayed reduced susceptibility to cefotaxime due to an enzyme of pI 7.4, while resistance to cefotaximein one P. penneri was related to an enzyme of pI 6.8. Both enzymes were active on cefotaxime (1,000 mg/l)in the iodometric assay. CONCLUSION. The broad extended spectrum betalactamase with in genus Proteus was TEM-1, while CTX-M-2 was the ESBL responsible for the third and fourth generation cephalosporins in P. mirabilis. In P. vulgarisand P. penneri this resistance was associated with the hyperproduction of the chromosomal encoded betalactamase (AU)

Caracterización y distribución de especies de Citrobacter en un hospital universitario / Characterization and distribution of Citrobacter strains in a University Hospital

OBJETIVOS. a) Identificar a nivel de especie las cepas pertenecientes al género Citrobacter, siguiendo el esquema de pruebas bioquímicas convencionales propuesto por Brenner et al; b) determinar la utilidad de la llave dicotómica de O Hara comparándola con el esquema propuesto por Brenner et al, evaluando su sensibilidad y especificidad, y c) establecer la distribución y frecuencia de las diferentes especies en los especímenes clínicos. MATERIALES Y MÉTODOS. Se estudiaron 122 cepas aisladas en forma consecutiva, única e ininterrumpida en el período comprendido entre mayo de 1994 y agosto de 1997, que fueron identificadas como Citrobacter spp. Las mismas provenían de distintos materiales clínicos correspondientes a pacientes hospitalizados y ambulatorios atendidos en el Hospital de Clínicas. Los organismos fueron identificados según el esquema propuesto por Brenner y la llave dicotómica de O Hara. RESULTADO. El esquema de Brenner identificó a nivel de especie 111 cepas de las 122 estudiadas. C. freundii fue la especie más frecuente (59/111), seguida por C.koseri (18/111), C. werkmanii (15/111), C. braakii (9/111), C. youngae (6/111) y C. amalonaticus (4/111). La llave dicotómica de O Hara identificó el 94 por ciento de las cepas estudiadas (104/111).Para C. freundii los sitios de infección o colonización más frecuentes fueron el tracto urinario y el intestino, (p Fischer <0,026 y 0,039 respectivamente). Para C. koseri al igual que para C. freundii, el sitio de infección más frecuente fue la orina (p Fischer <0,0372). CONCLUSIONES. El esquema de O Hara podría ser una alternativa válida para la identificación de las citrobacterias en los laboratorios de microbiología, teniendo en cuenta que éstas son importantes patógenos oportunistas (AU)

Isolamento e caracterização de uma nova raça de Pseudomonas capaz de degradar p-clorofenol / Isolation and characterization of a new para-chlorophenol degrading strain of Pseudomonas from samples of natural waters

A partir de amostras de águas naturais foram isoladas cinco cepas bacterianas capazes de degradar o p-clorofenol, as quais foram caracterizadas como bacilos Gram-negativos e oxidase-positivas. Uma das cepas (CS2) foi caracterizada como pertencente ao gênero Pseudomonas, logrando uma mineralização rápida e completa. Para esta cepa autóctone, se estudou a influência de diferentes parâmetros, tais como a concentração de p-clorofenol, toxidade, biodegradação de compostos xenofóbicos associados com a velocidade de crescimento. A velocidade de crescimento e a remoção do substrato em estudo foram determinadas de forma simultânea. A forma não dissociada do p-clorofenol não mostrou efeitos tóxicos quando utilizado em diferentes pH. A remoção do substrato em misturas contendo fontes de carbono alternativas demonstrou a possibilidade de um crescimento concorrente. A pré-exposição das populações microbianas ao p-clorofenol, indicam mudanças nas velocidades de biodegradação observadas.

Action of Halogenated Compounds on Aspergillus Conidiospores.

The fungicidal activity of two halogenated compounds against conidiospores of four Aspergillus strains ( A. flavus and A. sydowi isolated from a poultry farm, A. parasiticus NRRL 2999 and A. niger 29-CCM-A 41) was studied. Accordingly, the sodium salt of a synthetic organic compound derived from trichloroisocyanuric acid and an organic complex of iodine (iodophor) were used at 20°C at their recommended dilution (0.1%). More than 99.9% of the exposed spore population of all strains was inactivated within 30 min of contact with either product. During the first minute of contact, the iodophor solution was more effective than the chlorinated one. Among parameters tested on A. niger conidiospores, a 10°C temperature rise slightly increased antimicrobial activity, which was substantially affected by dilution, the active principle being exhausted when using 0.05% concentration. In addition, organic matter (1% human serum) practically neutralized the fungicidal effect of both compounds, whereas acid pH (5.33) notably increased the antimicrobial capacity of the chlorinated derivative.